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抗体组库技术筛选特异性抗体

人源化抗体是指抗体的可变区部分(即Vh和V1区)或抗体全部由人类抗体基因所编码。人源化抗体可以大幅降低医院抗体对人类集体造成的免疫副反应。人源化抗体的而形式也从最初的嵌合抗体、改型抗体等逐步发展为人源化抗体。

全人抗体是治疗性抗体的发展趋势,目前通常使用抗体组库的方法生产全人抗体。抗体库技术的发展使体外不经过免疫获得抗体成为可能。原理都是将抗体分子片段展示在某介质的表面,通过与固定的抗原经过多轮结合-洗脱-信号放大,获得特异性抗体片段。由于筛选基于竞争结合的机制,抗体库中拷贝数多的抗体会优先被筛选出来,不利于筛选出高亲和力、低拷贝数的抗体。将经过1~2轮筛选后的抗体库直接测序,就可以筛选出传统方法难以发现的高亲和力、低拷贝数抗体。

经典的抗体库都是通过噬菌体外壳蛋白Ⅲ和蛋白Ⅷ融合单链抗体(ScFv)的形式展示于噬菌体表面, 继而通过多轮的抗原淘选可获得完全人源的单链抗体(ScFv)。现在有一种改进的方法可以使ScFv的筛选完全在体外完成。该技术从ScFv基因文库开始, 在非细胞系统使基因转录, 基因中不插入终止子, 形成一个RNA-ribosome-ScFv 复合体, 以类似噬菌体库的筛选方式得到特异结合靶分子的复合物之后,分离RNA 进行PCR扩增 , 在扩增的同时还能引入突变,刺激亲和力成熟过程并获得包含更高亲和力的次级抗体库。

泓迅科技提供抗体组库测序服务,结合高通量测序技术,全面评估免疫系统的多样性,从宏观与微观的角度观察与分析T细胞和B细胞,能够广泛的应用于疾病监控、抗体生产、疫苗研究和健康体检等领域中。

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